Abstract Background and objectives: Gene therapy using urokinase-type plasminogen activator (uPA) has been shown to induce extracellular matrix degradation, hepatocyte proliferation and liver tissue function restoration in liver cirrhosis models. Physiologically, uPA activates plasminogen conversion to plasmin, which leads, depending on the organ, to thrombolysis or extracellular matrix degradation. The purpose of this study was to compare the regenerative effect of gene therapy with adenoviruses encoding wild-type uPA (huPA), as well as its truncated isoform (ΔhuPA), in healthy and cirrhotic animals. In addition, possible adverse effects on coagulation were assessed. Methods: 6 x 1011 vp/kg of Ad-huPA or Ad-ΔhuPA were administered via the iliac vein to healthy male Wistar rats or to male Wistar rats with cirrhosis induced by chronic poisoning with carbon tetrachloride (CCl4). The animals were sacrificed at day 2, 4 or 6 post-treatment. Liver fibrosis, proliferating cell nuclear antigen expression, alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) serum levels and coagulation markers were evaluated. Results: On day 6 post-treatment, a fibrosis reversal of 48.7-41.5 % was achieved. AST and ALT levels did not change in cirrhotic animals treated with ΔhuPA, but showed an elevation in healthy animals. Cell proliferation increased in healthy and cirrhotic animals with both transgene isoforms. No coagulation adverse effects were observed in the ΔhuPA group, and by day 6, they had disappeared in the huPA group. Conclusions: Gene therapy with Ad-huPA and Ad-ΔhuPA favors cell proliferation in cirrhotic animals, without important side effects.

Resumen Antecedentes y objetivos: La terapia génica empleando el activador de plasminógeno tipo urocinasa (huPA) ha demostrado que induce la degradación de matriz extracelular, la proliferación de hepatocitos y el restablecimiento de la funcionalidad tisular en modelos de cirrosis hepática. Fisiológicamente, el uPA activa la conversión del plasminógeno en plasmina, lo que conlleva, dependiendo del órgano, una trombólisis o a degradación de la matriz extracelular. El objetivo de este estudio fue comparar el efecto regenerador de la terapia génica con adenovirus codificando la forma silvestre (huPA), así como su isoforma truncada (DhuPA) en animales sanos y cirróticos. Además, se valoraron los posibles efectos adversos sobre la coagulación. Métodos: Se administró 6x1011 pv/kg del Ad-huPA o Ad-DhuPA a ratas Wistar macho sanas o con cirrosis por intoxicación crónica con tetracloruro de carbono (CCl4) vía vena ilíaca. El sacrificio fue al día 2, 4 o 6 postratamiento. Se evaluó la fibrosis hepática, la expresión de antígeno nuclear de proliferación celular y niveles séricos de alanina aminotransferasa (ALT) y aspartato aminotransferasa (AST), y marcadores de coagulación. Resultados: Al día 6 postratamiento se alcanzó una reversión de fibrosis del 48.7-41.5%. Los niveles de AST y ALT no cambiaron en animales cirróticos tratados con DhuPA, pero aumentaron en animales sanos comparados con el control sano no tratado. La proliferación aumenta en animales sanos y cirróticos con ambas isoformas del transgén. No se observaron efectos adversos en la coagulación en el grupo DhuPA y para el día 6 habían desaparecido en el grupo huPA. Conclusiones: La terapia génica con Ad-uPA y Ad-DhuPA favorece la proliferación celular en animales cirróticos, sin efectos secundarios importantes.

Abstract Aim: The aim of this study is to report the tolerability, safety and efficacy of a topical triamcinolone acetonide-loaded liposomes formulation (TA-LF) to prevent clinically significant macular edema (CSME) after femtosecond laser-assisted cataract surgery (FLACS). Methods: Fifty-five eyes of 32 patients who underwent FLACS were enrolled. Twenty-seven eyes were assigned to the TA group whereas twenty-eight eyes were assigned to the TA-LF group. In the TA group, eyes were exposed to a conventional topical formulation of triamcinolone acetonide 0.1% for 21 days postoperatively, whereas patients in the TA-LF group received a liposomal formulation containing 2 mg/ml of TA (0.2%). A follow-up consisting on slit-lamp examination, visual acuity, contrast sensitivity, central foveal thickness (CFT) and total macular volume (TMV) (both measured by retinal optical coherence tomography) was performed. Study visits were scheduled at 1 day, 6, and 12 weeks after surgery. Results: The incidence of CSME in the TA group at 6 weeks was 22.2%, in contrast, the incidence of these finding in the TA-LF group was 0%. A conventional steroid formulation (TA 0.1%) was associated with an increased risk of CSME (OR, 9.44; 95% CI, 1.76 - 50.66; p = 0.027). Finally, no ocular or systemic adverse events were reported in any group. Conclusion: TA-loaded liposomal formulation is effective for the prevention of CSME associated with FLACS, and it seems that its therapeutic activity could be superior to the activity of a conventional topical steroid formulation.

Resumen Objetivo: El objetivo de este estudio es informar la tolerabilidad, la seguridad y la eficacia de una nueva formulación de liposomas de uso tópico cargados con acetónido de triamcinolona (FL-AT), útil en la prevención del edema macular clínicamente significativo (EMCS) que ocurre después de la cirugía de catarata asistida con láser de femtosegundo (FLACS). Métodos: Se estudiaron 55 ojos de 32 pacientes a los que se realizó FLACS. Se asignaron 27 ojos al grupo de acetónido de triamcinolona (AT), mientras que 28 ojos fueron asignados al grupo de FL-AT. En el grupo de AT, los ojos se expusieron a una formulación tópica convencional de AT al 0.1% durante 21 días tras la cirugía, mientras que los pacientes en el grupo FL-AT recibieron una formulación liposomal que contenía 2 mg/ml de AT (0.2%). Se realizó un seguimiento clínico que comprendió: examen con lámpara de hendidura, agudeza visual, sensibilidad al contraste, grosor foveal central y volumen macular total. Las visitas del estudio se programaron los días 1 y 6 y al final de la semana 12 del periodo postoperatorio. Resultados: La incidencia de EMCS en el grupo de AT a las 6 semanas fue del 22.2%, en contraste con el grupo de FL-AT, en el cual fue de 0%. La formulación de esteroides convencionales (AT al 0.1%) se asoció con un mayor riesgo de EMCS (OR: 9.44; IC del 95%: 1.76-50.66; p = 0.027). Finalmente, no se reportaron eventos adversos oculares ni sistémicos en ningún grupo. Conclusión: La FL-AT es eficaz para la prevención del EMCS asociado con FLACS, y parece que su actividad terapéutica es superior a la actividad de la formulación de esteroides tópicos convencionales.

Hepatitis C virus (HCV) infection represents a global health problem due to its evolution to hepatic cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The viral pathogenesis and infectious processes are not yet fully understood. The development of natural viral resistance towards the host immune system represents a mayor challenge for the design of alternative therapeutic interventions and development of viral vaccines. The molecular mechanisms of hepatic fibrosis are well described. New alternatives for the treatment of patients with HCV infection and hepatic cirrhosis are under intensive research. New drugs such as viral protease inhibitors and assembly inhibitors, as well as immune modulators have been studied in clinical trials. Additional alternatives include antifibrotic drugs, which reverse the hepatic cellular damage caused by HCV infection. This review makes reference to viral infective mechanisms, molecular pathways of liver fibrosis and overviews conventional and new treatments for HCV infection and liver fibrosis.

Liver fibrosis and cirrhosis involve multiple cellular and molecular events that lead to deposition of an excess of extracellular matrix proteins and increase the distortion of normal liver architecture. Etiologies include chronic viral hepatitis, alcohol abuse and drug toxicity. Degradation of these matrix proteins occurs predominantly as a result of a family of enzymes called metalloproteinases (MMPs) that specifically degrade collagenous and non collagenous substrates. Matrix degradation in the liver is due to the action of at least four of these enzymes: MMP-1, MMP-2, MMP 3 and MMP 9. In the fibrinolytic system, MMPs can be activated through proteolytic cleavage by the action of urokinase plasminogen activator; a second mechanism includes the same metalloproteinases. This activity is regulated at many levels in the fibrinolytic system. The main regulator is the PAI- 1. This molecule blocks the conversion of plasminogen into plasmin, and the MMP cannot be activated. At a second level, the inhibition is possible by binding to inhibitors called TIMP that can inhibit the proteolytic activity even when the MMPs had been previously activated by plasmin. During abnormal conditions, overexpression of these inhibitors is directed by the transforming growth factor-β that in a fibrotic disease acts as an extremely important adverse factor.

La fibrosis hepática involucra múltiples eventos celulares y moleculares que inducen un excesivo depósito de proteínas de matriz extracelular que distorsionan la arquitectura del parénquima hepático, cuya etapa final es conocida como cirrosis. El daño proviene de una variedad de causas como abuso de drogas y enfermedades virales, autoinmunes, metabólicas y colestásicas. La degradación de estas proteínas de matriz ocurre predominantemente como una consecuencia de la acción de metalopro teinasas (MMPs) que degradan sustratos colágenos y no colágenos. La degradación de la matriz en el hígado se lleva a cabo principalmente por la acción de cuatro de estas enzimas: MMP-1, MMP-2, MMP-3 y MMP-9. En el sistema fibrinolítico, las MMPs pueden ser activadas a través de un corte proteolítico por acción del activador de plasminógeno tipo urocinasa y un segundo mecanismo de activación es realizado por las mismas MMPs. La regulación para restringir la actividad puede ser a diferentes niveles; en el sistema fibrinolítico el principal regulador es el PAI- 1, molécula que bloquea la conversión de plasminógeno a plasmina y la MMP no puede ser activada. Un segundo nivel de inhibición es posible a través del TIMP, que inhibe la actividad proteolítica aun cuando las MMPs hayan sido activadas vía plasmina. Durante condiciones patológicas la sobreexpresión de estos inhibidores es dirigida por el factor de crecimiento transformante β, el cual en un padecimiento fibrótico actúa como el más importante factor adverso.

Parkinson disease is a neurodegenerative disorder that affects 50/100,000 individuals in Mexico. Parkinson disease is characterized by reduction in dopamine content of the substancia nigra pars compacta resulting in 1055 of domamine-containing neurons. The postulated cause of the disease includes several processes: 1. a growth factor deficiency, such as nerve growth factor and brain-derived neurotrophic factor, cytokines which can prevent and protect neuronal cell death; which may regulate glial phenotype, T lymphocytes and Blymphocytes functions, and the surviving pathway signals; 2. dysfunction of the ubiquitin-proteasome system related to the histophatology of this disease; and 3. excitotoxic mechanisms, resulting in information of free radicals and the neuroinflammatory processes leading to autoimmunity or a failing immune response.

La enfermedad de Parkinson es una enfermedad neurodegenerativa que afecta a 50 de cada 100,000 habitantes en México y se caracteriza por una disminución en la producción de dopamina debido a la pérdida masiva de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra. Se ha postulado que la causa de la enfermedad es una combinación de procesos que incluyen: 1. la deficiencia de factores de crecimiento, como el factor de crecimiento nervioso y el factor neurotrófico derivado del cerebro, en citocinas que previenen y protegen del daño neuronal, median las funciones de la de la glia, los linfocitos T y B y favorecen las señales de supervivencia celular; 2. los defectos del sistema ubiquitina- proteasoma relacionados con la histopatología de la enfermedad; y 3. los mecanismos excitotóxicos que favorecen la formación de radicales libres y los procesos neuroinflamatorios que conducen a una respuesta inmune inadecuada.

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) family members include TGF-beta, activins, and bone morphogenetic proteins (BMP). These proteins are structurally related cytokines secreted in diverse Metazoans. TGF-beta family members regulate cellular functions such as proliferation, apoptosis, differentiation, and migration, and play an important role in organism development. Deregulated TGF-beta family signaling participates in various human pathologies including auto-immune diseases, vascular disorders, fibrotic disease, and cancer. Ligand-induced activation of TGF-beta family receptors with intrinsic serine/threonine kinase activity, triggers phosphorylation of the intracellular effectors of TGF-beta signaling, the Smads proteins. Once these proteins are activated they translocate into the nucleus, where they induce transcription of target genes and regulate cellular processes and functions. Novel therapeutic strategies are currently being developed to correct alterations in pathologies that involve TGF-beta as the main mediator.

El factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta) es una familia de proteínas que incluye al TGF-beta, activinas y a la proteína morfogénica de hueso (BMP, por sus siglas en inglés), citocinas que son secretadas y se relacionan estructuralmente en diferentes especies de metazoarios. Los miembros de la familia del TGF-beta regulan diferentes funciones celulares como proliferación, apoptosis, diferenciación, migración, y tienen un papel clave en el desarrollo del organismo. El TGF-beta está implicado en varias patologías humanas, incluyendo desórdenes autoinmunes y vasculares, así como enfermedades fibróticas y cáncer. La activación del receptor del TGF-beta propicia su fosforilación en residuos de serina/treonina y dispara la fosforilación de proteínas efectoras intracelulares (smad), que una vez activas se translocan al núcleo para inducir la transcripción de genes blanco, y así regular procesos y funciones celulares. Se están desarrollando novedosas estrategias terapéuticas encaminadas a corregir las alteraciones presentes en patologías que involucran al TGF-beta como actor principal.

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) family members include TGF-beta, activins, and bone morphogenetic proteins (BMP). These proteins are structurally related cytokines secreted in diverse Metazoans. TGF-beta family members regulate cellular functions such as proliferation, apoptosis, differentiation, and migration, and play an important role in organism development. Deregulated TGF-beta family signaling participates in various human pathologies including auto-immune diseases, vascular disorders, fibrotic disease, and cancer. Ligand-induced activation of TGF-beta family receptors with intrinsic serine/threonine kinase activity, triggers phosphorylation of the intracellular effectors of TGF-beta signaling, the Smads proteins. Once these proteins are activated they translocate into the nucleus, where they induce transcription of target genes and regulate cellular processes and functions. Novel therapeutic strategies are currently being developed to correct alterations in pathologies that involve TGF-beta as the main mediator.

El factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta) es una familia de proteínas que incluye al TGF-beta, activinas y a la proteína morfogénica de hueso (BMP, por sus siglas en inglés), citocinas que son secretadas y se relacionan estructuralmente en diferentes especies de metazoarios. Los miembros de la familia del TGF-beta regulan diferentes funciones celulares como proliferación, apoptosis, diferenciación, migración, y tienen un papel clave en el desarrollo del organismo. El TGF-beta está implicado en varias patologías humanas, incluyendo desórdenes autoinmunes y vasculares, así como enfermedades fibróticas y cáncer. La activación del receptor del TGF-beta propicia su fosforilación en residuos de serina/treonina y dispara la fosforilación de proteínas efectoras intracelulares (smad), que una vez activas se translocan al núcleo para inducir la transcripción de genes blanco, y así regular procesos y funciones celulares. Se están desarrollando novedosas estrategias terapéuticas encaminadas a corregir las alteraciones presentes en patologías que involucran al TGF-beta como actor principal.